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R/E 처리 후 ligation하는 방법이 일반적이죠..
일반적인 방법으로 실험이 안되면 문제가 있네요..
insert를 PCR로 증폭해서 옮기는 방법도 있지만 잘라서 연결이 안된다면 실험
방법적으로 문제가 있으며 R/E cutting, DNA elution, ligation, TF에 대한
각각의 실험방법에 대하여 다시 검토해 보시는것이 좋을 것 같습니다.
SPEED님이 말씀하신바대로 PCR을 해보는 방법이 있겠네요(primer design시 insert에 없는 enzyme site넣음).
하지만, 그렇게 되면 클론을 산 의미가 없지 않겠습니까만은...
insert cutting enzyme말고 다른 것으로 1 cut만이라도 test해보세요.
유독 inset부위만 cutting이 안된다면 산곳에 complain 하심이 실험하시는데 빠른 것입니다..