[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 sale 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
검색광고안내
과학기술용어에 대한 과기인 인식조사
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-Protein > Extraction/Isolation
조회 2564  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 Isoelectric focusing(IEF) 관련해서 기초적인 질문드립니다.
개구리순똘(대학원생)  | 2017.05.15 23:06

IEF 해본적이 없고, 셋팅을 해보고자 합니다.

pre-cast gel을 사용할까 생각 중이기도 하지만,

만들어서 쓸 수 있으면 만들어서 써보려고, 공부중입니다.


IEF에서 중요한 것은 pH gradient를 어떻게 유도하느냐 인데,

Arginine : pI 10.76
Lysine : pI 9.74
Anserine : pI 8.27
Histidine : pI 7.47
Histidyl-glycine : pI 6.81
Isoglutamine : pI 5.85 등의 ampholyte를 mixture 형태로 사용하여 pH gradient를 만들 수 있다고 확인하였습니다.


이때,

1. 일반적으로 pH3-7, pH3-10 range가 되도록 많이 사용하던데, 조성을 적절히 변경하여 제 맘대로 pH range를 조절해도 실험은 잘 될까요?? 아니면 pH3-7, 3-10에 비해, resolution이 안좋아 지는 등의 안좋은 점이 생길까요?

2. pH gradient가 생기는 순간은 gel이 만들어지면서 부터인가요, 아니면 전류가 흐르는 조건에 들어간 후부터인가요? (ampholyte mixture를 넣어서 gel을 만들던데, 딱히 pH gradient가 생기는 step은 없는 것 같습니다. gel이 만들어진 순간에는 모든 ampholyte가 고르게 분포하고 있다가, 전기가 흐르게 되면서 pH gradient가 형성되는 것 같은데, 자세히 공부를 하기 전에는 gel이 만들어지는 순간 이미 pH gradient가 형성되어 있을 것으로 생각하고 있었습니다.)

3. Tris-glycine gel과는 달리, FMN이라는 것을 사용하여, 빛을 이용해 gel을 굳히는 방법을 사용하던데, Tris-glycine gel처럼 그냥 ammonium-persulfate와 TEMED로 굳히면 안되거나 안좋은 점이 있나요???


IEF 초보자를 위해 고수님들의 친절한 답변 부탁드립니다.

#IEF
답변하기
첫 댓글을 달아주세요.첫 답변을 달아주세요.
답변하기
할인행사 광고 검색광고
하나과학 하나과학
Socorex 2020 BIG SALE event - Socorex Acura manual micropipe.. (1.31까지)
케이비티 케이비티
Mixer, Dry Bath, Heating Block, Thermo Shaker, Shaking Incub.. (10.22까지)
다온비에스 다온비에스
내 소중한 세포를 위해 안심하고 맡길 수 있는 WOLF Cell Sorter를 경험하세요! (12.31까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
무료 샘플로 명품 NEB의 DNA/RNA Purifucation 성능을 경험하세요. / NEBulider®.. (9.29까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
[에펜도르프코리아] Eppendorf 2020 하반기 프로모션 행사 : 실험실 필수품 피펫,원심분리기,PCR.. (12.31까지)
인성크로마텍 인성크로마텍
Phenotype MicroArray™ - Live Cell 에너지 대사 & 감수성 프로파일링 (10.31까지)
브래디 브래디
[브래디] 초저온라벨 등 실험실용 라벨링 솔루션 (COVID19 안전사인 등) (10.30까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
TECAN 한국대리점 20주년 기념 Microplate Reader & Washer 할인이 쏟아진다! (12.31까지)
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
2/6  좌우
887,200266,200
739,000702,100
309,000
136,000
924,000
379,000
201,30060,400
47,20044,900
79,50075,600
246,60074,000
136,000129,200
793,400238,100
245,20073,600
238,70071,700
50,00015,000
143,800136,700
158,40047,600
22,7006,900
555,000
80,40024,200
139,000132,100
230,000
388,500116,600
242,40072,800
최근등록   더보기 >
천연페니실린 합성 실험 가설   09.28
매실에서 amygdalin 추출   09.28
플라스미드를 진핵세포에 삽입할 때의 의문점   09.28
human cell total rna gel electrophoresis 결과 band 좀...   09.28
물의 전기분해에 대해 질문합니다.   09.27
전자 전달계로 사용하는 Pdx/Pdr에 관해서 질문이요ㅠㅠㅠㅠ   09.27
백금과 소금으로 물을 소독할 수 있는지요?   09.27
autophagy null cell을 특별히 사용하는 목적이 있나요?   09.27
RNA복제랑 DNA복제 비교   09.27
어떤 실험을 사용해야 할까요   09.27
(주)비아이코퍼레이션
실험관련연재
박은총 연재중후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
Mr.S 연재중의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재중실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
이제욱 연재중생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아 광고