실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.
본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
Plasmid에 하나의 Restriction enzyme을 처리한 뒤 정제 후 다른 Restriction enzyme을 처리하는게 맞습니다.
하지만 두 효소를 동시에 처리하는 경우가 많습니다.
두 효소자리가 떨어져 있을때, 두 효소의 적정 buffer가 같을때 그러합니다.
만일 두 효소자리가 너무 가깝거나 겹쳐있을때, 또는 두 효소가 잘 잘리는 buffer가 다를때는 어쩔 수 없이 자르고-정제하고-다시 자르고를 해야합니다.
-
레벨5
지나가는사람
-
17.04.01 14:16
위에 강시 선배님께서 말씀 하셨다 싶이...
Plasmid에 한개의 Restriction enzyme을 처리한 뒤, 반응을 시키고,
2차 Restriction enzyme을 처리를 하시면 되요.
하지만 여기서 중요한 것은 두 enzyme이 어느 site를 자르는지 잘 확인하시고,
어떤 Restriction Enzyme을 먼저 쓰실지 정하셔야 합니다.
왜냐하면 질문자께서도 잘 아시겠지만.... Restriction Enzyme마다 자르는 site가 틀리기 때문입니다.