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 전체 > Molecular Biology-RNA > Purification/Isolation
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질문 RT과정시 RNA농도계산 방법이요
알스윗피(대학원생)  |  2017.03.07 16:49
 RNA에서 RT를 진행하고 PCR를 할 것인데요


환자검체에서 처음 진행해보는 것이라....
kit를 이용하는데 protocol에 
처음 cdna합성과정에 RNA를 넣을때
total volume이 8ul가 되도록 하라고 하는데
이때 rna 농도계산을 어떻게 하는지 문의드립니다.


아직 rna뽑지 않은 상태라 농도가 나와있지 않지만 예를 들어 설명해주시면 감사하겠습니다.
#RNA
 
#NANO DROP
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앞다리뉴앱  |  2017.03.08   
 cDNA합성kit의 메뉴얼에 권장하는 RNA의 양이 나와있을거에요. 통상 1-2ug의 양을 사용합니다.
예를들어 RNA농도가 1ug/ul가 나왔으면 1ul를 합성하는데 사용하시면 됍니다.
요로콤  |  2017.03.08    
extraction 한 RNA의 농도를 재었더니 1 ug/ul 가 나왔다고 할께요.
그리고 cDNA 합성에 필요한 RNA량을 1 ug이라고 가정할때,
1 ul를 취하면 1 ug의 RNA가 되겠죠.
그리고 total volume 8 ul가 되도록 조정하라고 protocol에 나와있으니
나머지 7 ul의 DEPC water를 넣어주면 1 ug/8 ul가 됩니다.
여기에 protocol에 나와있는 시약들을 넣어주고 cDNA 합성하면 되요.


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