실험 Q&A Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
animal cell RNA 추출전 보관법 질문드립니다.
레벨1 빡실험러
이제 석사 들어가는 왕초보 석사생입니다. 저희실험실에는 가르쳐줄 선배가 없어서... 이렇게 브릭 선배님들께 질문같지않은 질문을 여쭙고자 합니다 (__)
제가 MC3T3-E1 cell에서 RNA를 추출하려고 합니다. 하지만 RNA kit이 2주가 걸린다고 하여
cell에 약물처리 후 -70도에서 보관한다음 2주뒤에서 RNA 추출을 진행하려고합니다.
1. 시약처리 후 cell에 남아있는 medium을 제거하고 PBS로 2번 washing 하고 동봉하여 거꾸로
-70도씨에서 보관하려고하는데 2주뒤에 상온에서 얼음이있는 상태로 scraper로 긁어 cell을
모아주려고 합니다. 이때 PBS buffer나 RBC Lysis buffer 같은걸 넣어서 모아주어도 상관없
을런지요? 아니면 여기에 Trypsin buffer를 첨가하여 cell을 harvest 해도 상관없는지
궁금합니다.
2. 보관할때 trypsin처리하여 cell을 수확한 후 down시켜 상층액을 제거시키고 pellet만 -70도에
보관해도 이후 RNA 추출시 문제되지 않을지 궁금합니다.
참고로 trizol을 사용하여 보관하는 방법은 저희가 시약이없어서.. 사용하지 못할것 같습니다.
답변 기다리겠습니다. 부탁드립니다 !!!!!!!!!
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