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 전체 > Molecular Biology-Protein > Expression/Purification
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질문 Ni-NTA column 추천 부탁드립니다.
hh  | 2017.02.06 15:22
 답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
안녕하세요. 대학원 신입생 학생입니다.
단백질은 분리 정제하는 실험을 하고 있는데
cell lysates준비하는 것까지는 대량으로 가능한데
Ni-NTA resin로 purification할 때 칼럼이 너무 작아서 5ml정도로 정제하고 있습니다.
큰 column쓰면 안되냐고 물으니까 Ni-NTA보다 작은 사이즈의 필터가 실험실에 없다고 찾아보라고 하더라구요
혹시 추천해주실만한 필터나 칼럼 있나요?
#Ni-NTA
 
#protein purification
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
ㅇㅇ  |  2017.02.13    
안녕하세요.


먼저 실험하실때 Ni-NTA 레진의 양을 5ml정도로 하시는게 맞나요? 보통 대장균으로 키웠을 때 발현되는 단백질의 양이 엄청나게 많지 않은 이상은 그정도의 레진 양으로도 충분히 회수가 가능합니다

일반적으로 사용되는 레진 1ml당 붙는 단백질의 양이 20mg정도 되니 5ml이면 이론적으로는 100mg정도까지 얻을 수 있죠


근데 원하시는 단백질의 양보다 적어서 이 글을 올리신 거라면 칼럼의 크기를 큰걸 사용하시는게 맞겠죠

더 큰 사이즈의 칼럼을 원하시면 보통 플라스틱 빈칼럼은 없고 유리로 된 빈칼럼을 사용하셔야 될거에요

그건 bio-rad glass econo column 많이 쓰는거 같더라고요
빔스바이오  |  2017.04.07    
 실험실에 FPLC가 있으시면 유리로 된 컬럼에 Ni-NTA RESIN을 충진하여 사용하시면 되고요.

FPLC가 없으시면 주사기를 이용하여 최대 30ml resin까지 사용이 가능한 컬럼도 있습니다.

아래 메일로 연락주시면 알려 드리겠습니다.
jampack65@gmail.com
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