[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
서린바이오사이언스
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
BioLab 장재봉 교수
전체보기 안전점검 LABox
 전체 > Molecular Biology-DNA > Southern Blot Analysis
조회 3358  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 southern blot시 일반 DNA Marker의 detection 문제
윤상훈  | 2017.01.25 11:26
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
제목과 같이 일반적으로 사용하는 DNA marjker가 southern 결과에서 항상 detection 되어 나옵니다.

probe는 roche사의 PCR lable kit를 사용하여 950bp probe를 제작하여 사용하였습니다.
PCR후 따로 purification은 하지 않고 사용하였습니다.

gel runing 하고 RedSafe Nucleic Acid Staining Solution (intron)으로 stain 하여 사진 찍고

이하 transfer , prehybridization, hybridization, wash, detection 과정을 수행하였습니다.

probe의 농도를 낮게하면 흐릿하게 나타나기는 합니다.

원인을 혹시 아시면 답변 부탁드립니다.
#DIG
 
#DNA Marker
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
꽃개구리느림보  |  2017.01.25   
마커 각 밴드의 농도가 아주 높기 때문에 비특이적인 결합이 생길 수 있다고 생각됩니다. 클로닝되어 있는 probe를 증폭하거나 잘라 쓸 경우에는 벡터 조각이 들어가서 더 그렇게 되고요.

예방하려면 마커와 샘플 사이에 빈 자리를 두고. 샘플에 가까운 자리의 마커는 눈에 보이지 않을 정도로 희석해서. 바깥 먼 쪽에는 사진을 찍을 수있을 정도로 걸면 됩니다.
답변하기
할인행사/신제품신기술 광고 검색광고
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN 한국공인대리점] TECAN Microplate reader/ IMPLEN Nanophotomet.. (4.11까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN한국공인대리점] TECAN 자동화장비 신년맞이 상담 이벤트 (3.31까지)
모아바이오 모아바이오
[AFG Scientific] *새해맞이* 20% 특가 할인 프로모션! 2만가지이상의 모든 ELISA Kit.. (2.28까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
한국인이 가장 많이 사용하는 Taq DNA Polymerase 파격할인! 1+1 행사! (12.31까지)
인성크로마텍 인성크로마텍
[Fluidic Analytics] Complex background 에서의 농도(conc.) 및 결합 친화..
코람바이오텍 코람바이오텍
[Cell Signaling Technology] Primary Antibody 전제품 20% 할인 행사 (2.28까지)
최근등록   더보기 >
protein purification 중 binding 문제   02.04
관리된 소 조직 구할 수 있는 방법이 있을까요?   02.04
Immunoprecipitation 후 immunoblot 결과 해석   02.04
western blot band 개선 좀 부탁드립니다 ㅠㅠ   02.04
qPCT Tm값   02.04
Fixed 조직 갈아서 FACS 해보신 분 계신가요?   02.04
실험하다답이안나와요   02.03
푸른곰팡이 배양 및 streaking 질문입니다   02.03
전체(항생제 미사용을 말하는 겁니다) 미생물상 배양법?   02.03
cell doubling time 질문   02.03
최근답변자 우수답변자
대왕개구리SPEED

개구리토라

알롱암몽키

꽃개구리bio

올챙이해조칼슘풍덩

알란울

개구리무광

알karan

대왕개구리SPEED

꽃개구리스카이

꽃개구리Jake

개구리처음처럼

개구리닥눈삼

꽃개구리착한사람

개구리Lucid

개구리propadrum

실험관련연재
세오 연재중실전 실험 프로토콜 101
세오 (필명) (Cincinnati Children’s Hospital Medical Center)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
박은총 연재마감후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
Mr.S 연재마감의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재마감실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
이제욱 연재마감생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
필코리아테크놀로지 광고