FITC가 linked한 peptide를 이용한 실험에 관련한 것입니다.(급하네요~~!!부탁드려요)
레벨1 이병우
제가 FITC가 linked된 peptide가 있습니다. 이와 또 다른 peptide가 있습니다. 편의상 FITC가 있는 것을 A라고 하고 없는 것을 B라고 명명한뒤 여쭤 보겠습니다. 저는 이 두개의 interaction을 알아 보는 binding test를 하고 있습니다. 다름이 아니고 이번주 부터 첨으로 해보는 실험인데요 먼저 FITC가 없는 B를 96well plate에 coating(4도씨,12시간)하고 하고 PBST를 이용하여 washing하고 3%BSA로 blocking(37도씨,1시간)한뒤 washing하고 난후 1%BSA로 FITC가 있는 A를 B와 같은 농도로 dilution 한뒤 binding(37도씨, 2시간,shaking)하여 washing하여 binding되지 않은 것을 제거 하였습니다. 그리고 PBST를 채워 absortion wavelength:495nm emission wavelength:528nm로 reading 했는데 결과가 negative control(only PBST)와 비슷하게 나왔습니다. FITC가 link된 peptide를 이용한 실험을 해보신 분이나 제가 실험한 방법에 오류가 있는 것을 아시는 분은 답변부탁드리겠습니다. 급하네요....부탁드리겠습니다.
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