1% Triton X100를 세포들에 처치한 후, 30분 뒤 230g에서 5분동안 centrifuge를 돌렸습니다.
96well plate 각 well당 50ul의 supernatant에 125ul NADH를 넣고 25ul 23mM sodium pyruvate를 넣고 바로 softmaxPro로 OD340nm에서 5분간 kinetic을 측정하였습니다.
결과를 봤는데 왜 positive값이 나오는지 이해가 가지 않습니다. 340nm에선 NADH의 농도를 측정하는것이라 알고 있고 그렇다면 5분동안 OD값이 점차 떨어져야 정상인데 (negative OD가 나와야 하는데) 왜 반대로 시간이 지날수록 OD값이 올라가고 positive OD인지 모르겠습니다.
또 아무것도 들어있지 않은 well의 값이 0.2정도를 계속 유지하다 갑자기 2분쯤에서는 0.5로 뛰더니 끝날때 까지 유지가 됐습니다.