실험 Q&A Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
Live/Dead assay시 형광현미경 이용 방법 아시는 분 도움 부탁드립니다~
레벨1 yk
안녕하세요, 세포 실험에 쩔쩔매는 석사과정입니다.
제가 3차원으로 세포를 형성하고 증식에 따른 apoptosis를 보기 위해서 live/dead assay 실험을 했는데요,
형광현미경으로 보니 초록색은 잘 보이는데 빨간색은 빨간색 강도(?)를 높이거나 줄이거나 따라서 밝기가 다르더라구요..
그러고 나서 merge를 하도라도 강도를 높이면 죽은 세포가 많이 나타나고 강도를 줄이면 죽은 세포가 없어요 ㅠㅠ
그 빨간 강도를 제 마음대로 임의적으로 정해서 해도 되는건지..
그런데 이럴경우, 첫날은 죽은 세포가 없는 것이 좋다고 생각해서 빨간 강도(?)를 낮춰서 이미지를 봤는데 마지막날까지(세포가 죽어야 하는 때) 그 강도가 낮아서 죽은 세포가 안 나타나면 어떻게 하죠 ;;;
이렇게 하는게 정상적인건가요 ㅠㅠ
이럴경우 실험 하는 사람의 주관이 너무 반영되는게 아닌가 싶어서요..
p.s) confocal 은 아니고 그냥 형광현미경입니다.
교수님은 펠렛 내부에 죽은셀을 보기 위해서 잘라 보라고 하시는데... 이게 필요한 걸까요?? 저희 실험실에서 할수 있는지 몰라요 ㅠㅠ
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