실험 Q&A Mol. Biol.-RNA > mRNA Analysis
real time PCR 질문좀 드릴께요
대학원생 (비회원)
안녕하세요.
마우스 colon에서 Q사 제품으로 RNA뽑은 후에 RT하여 real time PCR을 했는데
beta actin의 Ct값이 너무 높습니다.(27~34)
RNA농도가 낮아서 그런걸까요?
당연히 target gene의 Ct값은 그보다 훨씬 높습니다...
RNA추출시 농도가 낮아서(11~120ng/ul) RT시 RNA양이 최대 500ng, 적은건 110ng이었습니다.
이전 실험시에 최대 5ug까지 했었는데 양으로 보면 10배차이라 Ct값으로보면 3정도 밖에 차이가 안나야 하는데 너무 높네요.
혹시 RT시 문제가 생겼나해서 다시 한번 RT하여 해봤으나 비슷하네요.
퀄리티가 낮더라도 trizol로 RNA를 뽑아야할까요..? 조언 부탁드리겠습니다.
아참 조직 샘플이 적어 한두번밖에 RNA를 더 뽑을수없어서 신중합니다 ㅠㅠ
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