실험 Q&A Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
DAPI로 cell staining 한 결과가 이상합니다...ㅠㅠ여러분들 도와주세요
레벨1 rhm1621
제가 진행한 실험은 다음과 같습니다.
1. SK-BR-3 cell에 fluorouracil 을 24시간 처리
2. drug를 제거하고 Cell을 4% 파라포름알데히드로 20분간 fixation을 하고 PBST buffer로 10분간 permeabilization
3. 300nM DAPI staining solution을 5분간 처리후 PBS로 워싱
4.cell apoptosis를 확인하기 위해 DAPI 처리된 cell을 형광현미경으로 관찰
제가 드리고 싶은 질문은 아래와 같습니다
1. drug를 처리하지 않은 SK-BR-3 cell은 핵이 염색이 잘 되었다고 생각하여 fluorouracil을 24시간 처리 한 후에 DAPI로 staining 하여 형광현미경으로 보니 더 강한 형광을 띨 것이라는 예상과는 다르게 사진과 같이 분해된 흔적들이 보이고 이미지가 더 흐려지며 형광이 거의 염색이 되지않은 상태가 관찰이 되었습니다.
이론상으로는 DAPI는 죽은 셀에 더 강한 형광을 나타내는 것으로 알고 있는데 이렇게 이미지가 나타나는 이유는 뭘까요?ㅠㅜ 제가 어떤 부분을 잘못 알고 있는 걸까요?
2. SK-BR-3 cell with DAPI staining 사진의 오른쪽 부분과 같이 핵이 왼쪽부분의 사진과는 다르게 많이 퍼져 보이는 것이 관찰되고 있습니다. 이것은 뭐가 염색된 걸까요??이것도 핵인가요?
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