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gene editing 관련하여 질문 드립니다 (Cas9 system)
레벨1 mseong
안녕하세요. 현재 CRISPR/Cas9을 이용한 gene editing 실험을 하고 있는 학생입니다.
다름이 아니라 현재 제가 Cell에 Cas9 system 을 이용하여 gene에 reporter(fluorescene protein) 를 knock in 실험을 진행 중에 있습니다. 제가 알기로는 Cas9, gRNA, donor vector를 co-transfection하면 낮은 효율로 HDR pathway를 통해 knock-in 되는 것으로 알고 있는데
전혀 reporter 가 발현을 하지 않아서 답답한 마음에 글을 올리게 되었습니다.
gene editing에 관하여 논문도 많이 찾아보고 protocol 상으로도 점검을 해보았는데 문제점이 무엇인지 캐치를 잘 하지 못하고 있습니다.
혹시 실험하신 분들 중에서 제가 점검해야할 부분이나 확인해야할 부분에 대해서 조언해주시면 감사하겠습니다.
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