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16.05.28 09:35
독성평가쪽허고 다르지만 참고로말씀드리면 HDF로 iPS 만들때도 많이사용하는데 passage 14를 넘기지않습니다. 27좀 많아보입니다. Early passage를 thawing 해서 다시해보시면 되지않나요? 트립신 종류도 무엇인지모르겠지만 땠다가 붙일때 잘해주시고 워싱잘해주시고요 3분안해도 30초뒤 탁치면 다떨어지는데... 트립신에의해 떨어질때 까지기다리면 셀이 데미지받죠. 떨어지고난뒤 파이펫질 살살해줘야 새포가 오래동안 멀쩡허개 유지된답니다. 볼때 모양은 좋아보여도 세포입장에선 안그럴수있어요. 실험생활 새내기같은데 내공을 많이 쌓으셔야할듯보입니다. 바이오실험은 글로만 깨우칠수있는것에 한계가있습니다. 경험몇번더해보시면 감을 알게되실거에요.
세포를 교수님께 받으며 사용하는건데 교수님은 독성평가할때 passage는 상관이 없다그러시거든요..
트립신은 0.5%trypsin-EDTA 10x를 1x로 희석해서 사용중입니다. 3분처리도 교수님께 배운건데.. 요번에 다시할땐 1분30초 정도 두고 툭툭쳐서 떨어트렸거든요..
그러고 원심분리 하고 계대를 했는데 다음날에도 많이 떠다니는 모습이 보이는데 어떻게 해야할지 감이 안오네요..ㅠㅠ 저도 세포를 새로받고싶긴 하지만 교수님께서 거의 안풀어주셔서..