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질문 Enzyme cut을 하는데...
하진줍  | 2016.02.12 15:52
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
지금 vector 랑 insert를 같은 제한효소로 자르고 ligation 하려는데요
Ecor1과 Sma1으로 자르는데 제가 모르고 enzyme cut할때
제한효소 대신 프라이머를 넣고 두시간동안 37도 incubator에 
넣어두엇는데요 두시간뒤에 생각해보니까 잘못된걸 알고
그제서야 프라이머 넣은곳에 제한효소도 같이 넣어줫는데요 
지금 실험을 다시 시작하기엔 template가 없는데 
enzyme cut이 될까요...? 요약하면 
제한효소랑 프라이머를 같이 넣음... ㅠㅠㅠㅠ
#Enzyme cut
 
#Cloning
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개구리분자생물학이란  |  2016.02.12   

제한효소는 특이적으로 잘라야하는 곳만 인식해서 자르는 효소이니..
알아서 vector랑 insert의 restrction site를 잘랐을 것으로 예상됩니다.

어차피 digestion하고 gel extraction을 하실 테니,
그때 primer는 다 제거되겠죠.
insert가 primer만큼 작지는 않다는 조건하에..

뒷다리Zidane  |  2016.02.12   
enzyme양이 충분하다면 cut이 잘 되었을겁니다. 
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