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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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질문 HEK293 CELL 질문입니다...
알2jjiyo  | 2016.01.18 11:08
HEK293을 T-flask 풀고나서 보면 동글동글 둥둥 떠있어요 그리고 24h incubate 후에
확인해봐도 동글동글 둥둥 떠있고.. 하루 더 둬도 둥실둥실..
세포버리고 새로운 세포로 풀어도 계속 이상태네요
배지는 DMEM+FBS(10%)+p/s(1%) 쓰고 있습니다.. PBS로 워싱도 못해봤네요
아예 붙질 않아서ㅠㅠ

HEK293을 여기서 처음 키워봐서,
키우는데 원래 잘 부착이안되는건지..아니면 다른 분들 말씀대로 DISH를 코팅해서 써야하는건지 아니면 Contam이 된건지 모르겠네요 ㅠㅠ

ps.혹시 dish 코팅은 어떻게 하는 건가요? 많이 어렵나요?
주세요..ㅠㅠ...
#HEK293
 
#HEK293배지
 
#HEK
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리바보에게바보가  |  2016.01.18   

24시간 후에도 붙지 않는다면 stock 자체가 맛이 갔을 가능성이 큽니다.
293 세포가 부착력이 약한 편이기는 하나, 반드시 코팅이 필요하거나 하지는 않습니다.
Dish 코팅은 전혀 어렵지 않습니다. 그냥 코팅 용액 (polylysine, gelatin, etc)을 dish가 커버될 만큼 부어주고 일정 시간 incubation한 후에 걷어내고 사용하면 됩니다.

생물학도  |  2016.01.18    
HEK293 cell을 오랜 기간 culture해 왔는데

cell 이 동그랗게 떠있는 현상을 본적이 없습니다.

Media는 제가 사용하던 조성과 같은 걸로 보아

윗 분 말씀처럼 cell 상태 자체가 좋지 않은 것은 아닌가 의심이 갑니다.

Cell stock을 다시 thawing해 보는 것을 추천 드립니다.

참고로 저는 dish 코팅은 하지 않고 일반 cell culture dish 사용해 배양했습니다.
알2jjiyo  |  2016.01.20   
감사합니다 ! 혹시 한가지만 더 묻는다면..
13년도에 stock되있는 cell을 꺼내서 사용한건데 좀 오래된거라서 맛이 간걸까요?
나그네  |  2016.02.05    

cell 스탁 제작이 잘 못 된것으로 보입니다.

개구리애니  |  2016.07.19   
HEK293이 굉장히 잘 떨어진다고들 하시는데 제가 키우는 셀은 아무리 쳐도 안떨어집디다...ㅋㅋ
코팅 안하셔도 잘 붙고 잘 자랍니다. 둥둥 떠있는건 아무래도 스탁 제작이 잘못된 것으로 보입니다
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