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| 전체 > Molecular Biology-DNA > Gene Cloning |
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TA cloning 관련 |
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 cockatoo | 2015.12.22 13:48 |
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제가 ta cloning을 하려고 하는데 ta cloning의 원리가
t vector의 3`end의 T와 PCR Product의 3`end의 A가 붙게 하는건가요?
그리고 꼭 pnk처리(T4 Polynucleotide kinase)를 해줘야하는지 알고 싶습니다,
해주어야 된다면 왜 그런지도 알려주세요 ㅠㅠ
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본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다. |
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 안재진 | 2015.12.22
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원리는 맞습니다.
일반적인 Taq을 쓰면 PCR product는 A tail을 가지고 있습니다. 그것은 벡터와 연결하는 작업입니다.
kinase 처리는 필요 없습니다. Taq 을 이용한 합성에서는 phosphodiester bond가 가능한 PCR prodcut가 나오기 때문입니다. |
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cockatoo | 2015.12.23
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그럼 taq을쓰면 A tail이생기고 A에 phosphate group이 있기때문에
t vector와 phosphodiester bond도형성하고
Vector의 T와도결합하게된다는 것인가여?
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강시 | 2015.12.23
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A tail에 인산기가 붙지는 않습니다. 3'이기 떄문이죠.
그 상보가닥의 5'에 인산기가 붙죠. |
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