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 전체 > Molecular Biology-DNA > Gene Cloning
조회 3455  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 TA cloning 관련
알cockatoo  | 2015.12.22 13:48
제가 ta cloning을 하려고 하는데 ta cloning의 원리가 
t vector의 3`end의 T와 PCR Product의 3`end의 A가 붙게 하는건가요?
그리고  꼭 pnk처리(T4 Polynucleotide kinase)를 해줘야하는지 알고 싶습니다,
해주어야 된다면 왜 그런지도 알려주세요 ㅠㅠ

#TA cloning
 
#pnk처리
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리안재진  |  2015.12.22   
원리는 맞습니다.
일반적인 Taq을 쓰면 PCR product는 A tail을 가지고 있습니다. 그것은 벡터와 연결하는 작업입니다.
kinase 처리는 필요 없습니다. Taq 을 이용한 합성에서는 phosphodiester bond가 가능한 PCR prodcut가 나오기 때문입니다.
알cockatoo  |  2015.12.23   
그럼 taq을쓰면 A tail이생기고 A에 phosphate group이 있기때문에
t vector와 phosphodiester bond도형성하고
Vector의 T와도결합하게된다는 것인가여?

대왕개구리강시  |  2015.12.23   
A tail에 인산기가 붙지는 않습니다. 3'이기 떄문이죠.
그 상보가닥의 5'에 인산기가 붙죠.
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