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 전체 > Molecular Biology-DNA > Sequencing
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질문 PCR product의 sequence를 어떻게 알 수 있나요?
알biomed3193  | 2015.11.18 09:42
Primer는 논문에 있는 그대로를 사용하여서
Total  RNA에서 RT-PCR을 하였는데
vector에 삽입하여서 sequencing을 업체에 맡기는 것 말고
제가 증폭한 부분의 sequence를 알 수 있는 방법..어떤 것이 있나요?
#PCR
 
#Sequencing
 
#RT-PCR
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리현직백수  |  2015.11.18   

먼저 시퀀싱 결과는 앞의 80bp와 800bp이상은 버리는게 좋습니다.
가장 좋은것은 TA 클로닝 후 유니버셜 프라이머로 시퀀싱 하는것이지만..
간단히 확인하시고 싶으시다면

기존 PCR 프로덕트를 겔익스트레션 후. 200ng 이상을
PCR 프라이머와 함께 보내면 됩니다.
이 단계에서 로스가 많으니, 3개 이상의 웰에서 겔익스트레션 하시길 권합니다.

마지막으로
양방향으로 읽으면 읽을수는 있습니다.
단 150 bp이하라면 보증 못합니다.

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