실험 Q&A Cell Biology > Viability
3D Porous Scaffold 내에서 Cell viability assay 및 ALP assay 관련 질문입니다.
레벨1 몬스토
다공성의 3D Scaffold 내에서 줄기세포를 키워서 골분화를 하려고 합니다.
실제 scaffold 내에서의 cell viability 가 MTT, MTS 등 assay 는 배지 내의 cell 을 보는 것이라. 직접적으로 scaffold 내에서의 cell viability 를 보는데 도움이 될까요?
관련 논문을 많이 보았지만 대부분 그냥 MTT Assay 를 통해서 cell viability 를 확인하였으나 실질적인 scaffold 내에 있는 cell 을 확인하는 방법인지 의문입니다.
Scaffold를 고정 및 염색 후에 confocal microscopy 를 통해서 확인해야 되는건지.
아니면 다른 논문과 같이 단순히 배지 속의 세포를 MTT assay 를 통해 확인하면 되는건지 아니면 논문이 많이 생략되어 표현 되어 있는건지 궁금합니다.
두번째로 거의 마찬가지 질문인데요. 뼈의 분화를 보기 위해 정성적 방법인 ALT assay 도 지지체 내에 있는 세포들이 잘 표현될까 궁금하네요. 지지체 자체를 어떻게 제거를 해서 세포 취득해야 할지 의문입니다. (기타 논문에는 PBS로 워시하고 Triton X-100 같은 buffer 를 사용하는 것 같습니다.)
실험을 처음하는지라 너무 아는 것이 없습니다. 죄송합니다. ㅠ 꼭 답변 좀 부탁드리겠습니다.
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