coIP를 하고 있는데 언젠가부터 이상하게 eluate에서 band가 나오질 않고 signal이 번져서 나옵니다. flow through를 확인해보면 target protein이 거의 없어진걸 확인할 수 있는데 이상하게 eluate를 걸어보면 band가 안나오거나 target protein 근처에 밴드가 번져서 나옵니다. 동일한 조건으로 전에 실험을 했을때는 잘 나왔었는데 이상하게 요즘 이런 문제가 발생하네요. pull down은 rabbit polyclonal + protein A bead로 하고 detection은 rabbit mono/mouse mono (dual detection) 으로 합니다. detection은 LiCOR system을 사용하구요. eluate에서 혹시나 IgG가 안보이나 해서 보면 IgG는 정확하게 잘 떨어져나온게 보입니다. target protein은 100kDa정도 입니다.