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질문 조직 고정 (tissue fixation)을 포르말린으로 오래하였을 때
앞다리초원잉  |  2015.09.15 15:36
랫드에서 샘플링한 난소와 자궁 조직을 3%포르말린 (30% 포르말린 원액 10배 희석)에 넣고 약 두달간 실온에 방치하였습니다.

이제 H&E staining 및 target protein 검출 위해 IHC를 하려고 하는데요,

예전에 알아보니 포르말린으로 조직을 오래 고정할 경우 포름말린에서 포름산이 형성되어 조직안의 혈액 내 RBC에 존재하는 헤모글로빈과 결합하여 hematein이라는 물질을 생성해 갈색 색소를 나타내게 한다고 하더라구요,, 그럼 나중에 안티바디 붙이고 ABC 이용하면 색이 헷갈릴 것 같은데..

그래서 해결방안을 알아보니 여러 방법이 있었는데,
1%KOH를 80% EtOH에 1%로 첨가한 용액을 10분간 담가두었다가 5분동안 수세하여 사용하는 방법이 있었고, embedding 전날 1x PBS에 조직을 담가두고 4도씨에서 overnight하는 방법이 있었습니다.

제가 궁금한 점은, 실제로 난소나 자궁조직을 포르말린에 올래 담가두었을 때 문제가 생기는지 궁금하여, 위와 같은 방법으로 해결가능한지 알려주시면 감사하겠습니다.


#포르말린
 
#IHC
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