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레벨5
유전학도^^v
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15.07.06 13:04
저는 IP하는데 epoxy magnetic beads (NOVEX, M-270) 사용합니다. 그런데 별로 안 좋더군요.
아무튼 가장 기본적인 방법은 분자량을 통해 0.375 nmole의 양을 계산하여 넣는 것이 가장 정확하다고 봅니다.
하지만 최대한 많이 붙여야 실험이 잘 될 걸로 생각하는지라, 저 같은 경우는 과량을 넣고, washing 과정을 많이 거쳤습니다.
경우가 다르긴 하지만, washing 후 나오는 supernatant들을 WB을 해서 coupling이 잘 되었는지 간접적으로 판단하였습니다.
1번에서 말씀하신 것과 같이,
메뉴얼에서 0.375 nmole의 수용력을 가진다고 했으니, 사용할 mg 수로 곱하여 최종량을 결정하세요.
그 양을 avidin 분자량을 사용해 계산하고 얼만큼의 avidin이 필요한지 확인한 다음,
coupling 시킬 때 집어넣고 실험하시면 됩니다.
2번 내용에 대해서는 실험적인 부분이라서 정확히 이론적인 수치가 맞아 떨어진다라고는 말 못하겠습니다.