실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > DNA Modification
CRISPR-Cas9 질문입니다
CRISPR (비회원)
최근 실험실에 CRISPR-Cas9 실험을 setting 하려하는데
어려움이 있습니다 ㅠ
우선 대부분의 논문이나 CRISPR-Cs9 plasmid를 판매하는 회사에서 보면
target gene이 insert된 CRISPR-Cas9 Plasmid가
세포에 들어갔는지는
GFP 또는 OFP 를 FACs를 이용하여 구분을 하거나
CDS4 단백질을 비드를 이용하여 구분을 하거나 하는데
정말 이 세포에서 target gene이 knock out이 됐는 지는
어떤 방법으로 구별을 할 수 있을까요????
그리고 Cas9 이 PAM 부분을 인식해서 DNA를 자른다고 했는데
그럼 Cas9이 PAM(NGG) 이 염기서열 부분을 모두 날려버리는 것인가요??
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