[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
연재지정자유공모모집
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-DNA > Sequencing
조회 2784  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 M13 phage display DNA질문입니다
앞다리규니규니  | 2015.01.20 18:49
NEB에서 phage library kit 를 구매해서 M13 phage display 진행했는데요
NEB에서 제공하는 메뉴얼 대로 DNA Purification을 하였습니다
그런데 이렇게 나온 DNA가 single strand 라고 하는데요
이 DNA가 원형인가요 아니면 linear 형태인가요?
sequendcing을 다른 회사에 의뢰하려니까 
PCR을 해서 보내하는데...
single strand 면 PCR이 불가능한 것 아닌가요? 프라이머가 한방향 밖에 제작되서....?
아니면 NEB에서 -28 g3, -96 g3 sequencing primer를 제공해서 최대한 이것을 이용하고 싶은데....어떻게 하는 것이 좋을까요?

#M13 phage display
 
#phage DNA
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리엘피스  |  2015.01.21   
M13 phage genome은 single strand circular DNA입니다.
M13 phage genome을 double strand DNA로 뽑으려면 phage particle이 아닌 host cell에서 뽑으면 됩니다.

PCR은 DNA 가 single이건 double strand이건 가리지 않습니다.
앞다리규니규니  |  2015.01.22   
감사합니다!! 
그럼 한가지 더 질문 드려도 될까요?
그럼 저는 phage particle에서 DNA를 뽑았는데
이걸 PCR진행 후  sequencing의뢰를 하려고 하는데 Primer를 한 쪽방향만 사용해도 되는건가요?
NEB에서는 이 경우 한 쪽방향 primer(-96 g3 sequencing primer)만 사용해도 가능하다고 하는데
정말로 가능한지 궁금합니다.ㅠ ㅠ

대왕개구리엘피스  |  2015.01.22   

PCR의 기법중에서 (기법이라고 부를 만한 것도 아니지만).
asymmetric PCR이라는 것이 있습니다. Primer 하나만 넣고 한 strand만 합성하는 것인데, 이 경우에는 PCR 증폭이 log스케일이 아니고 linear scale입니다.

일반적인 PCR에서 다량의 DNA를 얻고자 하는 경우에는 한 primer만 가지고는 목적을 달성할 수 없습니다.

만약 rolling circle amplification을 이용한다면 primer하나로도 충분하지만 역시 증포되는 률은 linear입니다.

답변하기
할인행사 광고 검색광고
다온비에스 다온비에스
[DNAGenotek] Oragene Collection kit 무료샘플 사용해보세요!! (7.31까지)
다온비에스 다온비에스
[DNAGenotek] Omnigene·GUT Collection Kit 무료샘플 사용해보세요!! (7.31까지)
브래디 브래디
초저온라벨 등 실험실용 풀칼라프린터 (COVID-19 안전사인 지원) (8.30까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
[체험단 모집] 소모품이 필요 없는 Cell counter Celldrop! 체험단 모집합니다. (7.24까지)
마크로텍 마크로텍
마크로텍 Ezscope현미경 마이크로톰 특가판매 및 현미경대여 (9.30까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN] Reading과 형광 Imaging을 하나의 장비로 한 번에!! [Multi-mode micr.. (8.31까지)
케이비티 케이비티
Mixer, Dry Bath, Heating Block, Thermo Shaker, Shaking Incub.. (7.10까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
COVID-19 진단 및 연구! TECAN과 함께하세요!! (9.30까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
[에펜도르프코리아] Eppendorf 2020 상반기 프로모션 안내 : 실험실 필수품 피펫,원심분리기,PCR.. (8.8까지)
프리미엄 등록안내
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
6/6  좌우
23,000
370,000
49,000
924,000
125,500119,300
93,20088,600
773,000734,400
79,50075,600
17,000
739,000702,100
468,000
493,000
870,000
52,60050,000
482,000
6,000
47,20044,900
339,400322,500
109,000
482,000
139,000132,100
92,30087,700
136,000129,200
66,50063,200
최근등록   더보기 >
RNA isolation 실험준비중 질문이 있습니다.   07.02
지노 타이핑 PCR밴드 안 나올 때.   07.02
단백질 보정 방법   07.02
Vilber lourmat사의 fusion SL 사용하시는 분 계신가요?   07.02
agar와 broth의 차이   07.02
plasmidDNA 형광   07.02
배지 파우더 농도 맞게 계산했는지 확인도와주세요ㅠㅠ   07.02
dilution   07.02
장내미생물에 처음 관심갖는 사람에 대한 조언 부탁드립니다.   07.02
raw 264.7 trypsin-EDTA 사용관련   07.02
IDT Korea
제품평가
[비아이코퍼레이션]
e브릭몰(연구용 제품 온라인 구매 사이트)
비아이코퍼레이션
모집인원: 50명
모집기간: ~7/15까지
신청조건: BRIC 회원
평가자 혜택

- 참가자 전원 3만원 상품권 제공

제품평가자 모집중
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크