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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
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질문 cleaved caspase3 band관련 질문입니다~
알raphaelfriend  | 2015.01.03 17:52
안녕하세요~ 혹시 이런경험이 있으신분 꼭 도와주세요~
tissue에서 western으로 cleaved casapse3를 잡으려고 했습니다.
참 안잡히다가 band가 나오긴하는데..
이상한게 있어서 질문합니다~ western 별로 안해봐서 모르는게 많네요..
ab는 cell signaling 9661을 썼습니다.

1. protocol엔 17,19 kDa가 나온다는데 제가 15%gel로 내렸을때는 two band가 나오긴하는데
    marker와 비교해보면 19, 23?정도로 더 큰 band가 두개 나옵니다. 원래 이정도는 gel           percentage같은거에 의해 달라질 수 있나요?

2. 제가 한실험이 똑같은 injury를 주고 한 그룹은 PBS, 한그룹은 약물을 처리했습니다.
근데 injury + PBS group은 two band가 나오고 
      injury + 약물 group은 위에 말씀드린 23? 정도의 band만 나옵니다.
제가 알기론 proform이 잘려서 이 두놈이 나오는걸로 알고 있는데 그룹간에 특정 cleaved form이 나오고 안나오는 경우는 어떤경우에 그럴수 있나요?
cell signaling 참고 그림에서는 staurosporin을 치면 1band만 나오고 cytochormc를 처리하면 2band가 나오던데 이런거랑 비슷한건가요?

3. 마지막으로 저 두 band를 가지고 정량을하려면 두 band의 intensity값을 합쳐서 보통 계산하나요?

감사합니다~
혹시 도움될 정보가 있으면 꼭 말씀해주세요^^


    
#caspase 3
 
#western blot
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