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1차 2차항체 모두 blocking solution 에 넣으시구요
blocking time도 늘려보세요.
그다음에 antibody dilution 비율도 높여보시구요
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western
(비회원)
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15.01.02 14:06
넵, 감사합니다
1차 항체는 1 :10000배로 희석해서 사용하였고, 2차 항체는 1 : 1000배로 희석한 후 사용하였습
니다~ 그리고 항체 반응시킬때 27도씨에서 교반배양기를 사용하여 반응 시켰는데요~
4도씨에서 반응시켜야 하나요??
1차 2차 항체 희석비율이 바뀐거 같은데요
그 비율이면 보통 1차를 1:1000, 2차를 1:10000으로 하죠~
그리고 1차붙일때 오버나잇으로 할꺼면 4도씨에서 천천히 붙이시고
당일에 바로 2차까지 보실려면 RT에서 붙이세요~
워싱과정은 교반속도도 높여서 깔끔히 워싱되도록 하시고..
blocking만 잘 되면 1차 2차는 그냥 TBS-T에 하셔도 괜찮습니다.