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primary cell contamination
도움요ㅠ (비회원)
몇일전 osteoblast를 3바이알 (lonza) 구입했습니다.
thawing할때, viability나 cell morphology 같은 것에는 아무 이상이 없어 배양하고 있었습니다.
3일이 지나 90%는 동결했고, 10%는 계대배양했으며, 그때까지 아무 문제 없었습니다.
계대배양하다보니 duobling time이 길어져 4일이 되어도 80%정도 찼었고
5일차 아침에 계대배양하려고 보니 약간 배지가 탁한 것이 느껴졌습니다.
바닥에 부착된 cell의 morphology에는 이상이 없고.. 다만 점점점 같은 알갱이가 있는 것 같아보였구요..
contamination 특유의 인큐베이터 퀘퀘한 냄새도 없고, 그전날까지 너무 아무 이상이 없어서
의아하게 생각되어 기존에 동결했던 cell들을 thawing했는데..
또이런식의 contamination은 처음이라..
역시 4일까지 멀쩡하다 5일차에 같은 증상으로 contamination...ㅠㅠ
그런데 3바이알 각각 풀었는데 지금 모두 같은 증상을 겪고 있습니다..
각기 다른날 배양했는데..또 똑같은 증상이 있으니.. 혹시 세포가 문제였나 싶기도 하고...
6년 넘게.. cell 배양하면서 머 이런 적은 첨이네요... 뭐가 문제였을까요?
모든 것은 다 protocol 대로 진행했고, 사용한 reagents 들에는 아무 문제 없었습니다.
test 했구요..
현재 동결했던 아이들을 다시 thawing해서
다른 박사님의 권유로 혹시나해서 mycoplasma removal reagent를 넣고 배양 중인데..
3일까진 아직 괜찮습니다.. removal reagets를 넣고 contamination이 안된다면..
이세포는 사용해도 되는 걸까요??
제가 다른 세포랑 co-culture할 것이라.. 나중에 실험 결과에 영향을 줄까봐 걱정이됩니다.
같이 키울 세포는 더더더더더더 비싼세포라서요;;
lonza측에서는 한번 계대배양을 한것이라 어떠한 보상도 해줄 수 없다는 입장이고..
앞이 깜깜합니다. 너무 주절주절 말이 많았네요;;
즉 저의 질문은..
1. 이런 contamination 경험해보신적 있으세요? 무슨 오염일까요?ㅠㅠ
2. removal reagents를 사용해서 오염이 없으면.. 본 실험에 사용해도 될까요?
3. 혹시 이런 경우 회사에서 보상받아 보신 적 있으신가요?
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