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샘플은 끓이셨나요?
단백질은 끓이지 않으면 stacking에서 빠져나오지 못하고 위에 걸리게 됩니다.
coomassie blue가 제일 위쪽에 집중되서 염색된 부분이 이런 이유같다는 ..
진짜 sample이 reduction이 하나도 안된거 같이 보이는데;;
3분간은 충분히 boiling 해주셔야 합니다.
1. 95도에서 끓이지 않았다? 저는 보통 3분 끓이는데 5분 정도 끓이는 경우도 많습니다. 단백질이 polypeptide로 변하여 크기와 gel 상 이동이 완전히 비례하게 만들어 주어야 하지요.
2. 샘플이 상했다. 아무리 잘 얼려놔도 간혹 그런 경우가 있습니다. 혼자 쓰는 냉장고나 deep freezer가 아니니깐요. 저도 한번에 샘플 왕창 얻어서 계속 실험하다가 6개월 정도 지나니깐 deep freezer를 너무 자주 여닫아서 그런지 저렇게 된 경험이 있습니다.