실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > DNA Modification
형질전환동물을 만드는 과정에 대한 질문입니다^^
형질전환 (비회원)
E.coli 의 경우 세포 밖에서 plasmid 를 재조합하고 그 plasmid를 transformation 시키고,
그 plasmid 자체가 E.coli 내에서 자가복제를 하고 재조합된 protein 발현도 하는데요.
동물세포의 경우, plasmid 등 vector를 통해 외래 DNA를 transfection 시켜 형질전환하는 건 알고 있습니다.
헌데 이 경우에도 plasmid 상태로 animal cell 내에 공존하면서 발현이 유지 되는 것인가요?
아니면 host의 genomic DNA 에 integration 되어서 유지되는 것인가요?
animal cell 에 GFP transfection 후, 초기에는 GFP 발현이 잘 되다가,
시간이 지나면서 점점 발현이 없어지던데요.
이건 transfection 시킨 DNA 자체가 점점 사라진다는 것 아닌가요?
animal cell 에서도 안정하게 자가복제되고 공존되는 vector가 따로 있는 것인지,
(CMV vector같은 경우 그냥 mammalina protein 발현을 위한 promoter 인 것으로 알고있습니다;)
아니면 낮은 확률로 host genomic DNA에 integration 된 cell colony를 찾아내서
이후에 핵치환 등을 하는 것인지, 그렇다면 그 확률은 어느 정도인지 궁금합니다^^
두서없는 질문 읽어주셔서 감사합니다^^*
Bio마켓 프리미엄