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미지 혼합물을 분석할 때는 HPLC로 바로 분석하기 보다는 샘플의 특성을 찾기 위해서 이화학적인 특성을 파악하는게 보통입니다만 HPLC로 바로 분석하는 것과 샘플의 특성을 찾은 후에 분석하는 것 중 어느 것이 시간이 적게 소모되는 지는 때에 따라 다르기 때문에 질문의 의도대로 HPLC분석을 먼저 진행하는 것도 의미가 있을 수 있습니다.
하지만 Gradient는 조금 달리하시는 것이 좋을 것 같습니다.
컬럼은 제일 일반적인 C18컬럼을 선정하고 진행하는 것이 좋습니다. (탄소함유량, pore size등에서)
Gradient는 물함량이 높은 상태에서 유기용매함량이 높은 상태로 진행합니다.
초기 분석 후 피크 모양에 따라 조건을 수정해 가시면 될 것 같습니다.
컬럼 선정이나 Gradient 조건에 대한 어려움이 있으시면 연락주세요.
bs.lee@ymckorea.com
column종류에 따라 다르지만 ACN/water를 이동상으로 사용하시는걸 보니 C18 column을 사용하시는 것 같은데....
처음엔 브로드 하게 Water:ACN 90:10 -> 0:100 까지 한시간 정도 gradient를 걸어주면서 peak 나오는 pattern을 확인하여 다시 조건을 잡으시는게 좋을듯
C18컬럼은 비극성 컬럼이니 처음에 ACN 95로 걸믄 앞에 죄다 뭉쳐 나올겁니다.
극성용매-> 비극성용매 %로 바꿔주시는게 일반적입니다.
역상 C18 column 을 사용할 거구요
아 ... 제가 반대로 생각을 했군요
Water : ACN : = 90 : 10 -> Water : ACN : = 80 : 20 -> Water : ACN : = 70 : 30 ...
이런 순으로 비극성을 더 늘려가면서 분석을 하는거였군요
감사합니다