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 전체 > Molecular Biology-DNA > Gene Cloning
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질문 Gel extraction에서 isopropanol 역할
알pyk2080  | 2014.07.15 13:34
안녕하세요,
다름이 아니라 Gel extraction protocol관련하여 궁금한 점 있어 질문드립니다.


Quiagen gel extraction kit 쓰고 있는데요,
protocol에 보면 DNA size가 4kb 이상이거나 500bp 아래이면 
1 gel vol. of isopropanol을 넣어주면 yield에 도움이 된다고 쓰여 있습니다.

여기서 isopropanol의 원리가 무엇인가요?
Isopropanol은 잘 dry도 안되고 DNA extraction까지 같이 들어가서 quality 떨어뜨릴 것 같은데
이건 괜찮은가요? 

아시는 분 답변달아주시면 감사하겠습니다 ^^

아! 그리고 cloning시에
vector. insert (T vector) 보통 몇 ug정도 enzyme cut해서 
gel loading 하시나요????? 
Gel extraction해서 nanodrop 쟀더니
농도가 너무너무 낮고, 그래프도 peaks가 없네요 ㅠㅠ
#Gel extraction
 
#isopropanol
 
#cloning
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
gel  |  2014.07.17    

isopropanol을 DNA가 녹아나오게 하는 역할 입니다.
gel extraction과정중 culonm을 이용하게 되면 DNA가 작은 것들은 culonm에 잘 붙지 못합니다. 작은 DNA일 수록 charge가 약하기 때문에 잘 부착하지 못하는 것인데요
그것으로 quality가 떨어진다는 걱정은 하지 않으셔도 됩니다.

그리고 두번째 질문은 1ug정도 cutting을 해서 모두다 loading후 cutting합니다.
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