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 전체 > Cell Biology > Viability
조회 2534  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 MTT시 DMSO grade 질문입니다.
궁금합니다  | 2014.07.04 12:07
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
안녕하세요.
MTT assay시에 포마잔을 녹이는 용도로 쓰이는 DMSO의 grade에 대해 여쭤보려고 합니다.

지금 MTT 실험을 대량으로 하는 중인데 (동물 cell의 viability를 확인합니다)
원래 포마잔을 녹이는 용도로 사용하는 DMSO를 sigma D4540 plant cell cultured test로 사용했습니다. (cell freezing 같은 경우는 grade가 더 높은걸로 사용합니다)

그런데 well 수가 많다보니까 금방금방 쓰게되고 가격이 부담되더라구요
MTT 처리 후 cell을 깨주고 포마잔을 녹이는 용도로만 쓰는 DMSO를 꼭 cell culture test로 사용해야 할까요? 일반 유기용매용 DMSO를 써도 되는지 여쭤보고 싶습니다.

원래대로라면 저희가 test를 해봐야 하는 부분인데 시간적 여유가 안되어 조언을 구합니다.
혹시 아시는분 있으시면 도와주세요 ㅠㅠ





#DMSO
 
#MTT
 
#grade
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
뒷다리퓨퓨  |  2014.07.04   
살아있는 세포에서 실험한다거나 특별한 주의가 필요한 경우가 아니고서야
MTT는 어차피 원심분리하고 밖에서 상등액 제거해주고 DMSO 넣어주고 해도 되는거니까요
DMSO 그레이드 낮은거 사용하셔도 무방합니다.
포마잔 녹여서 흡광도만 측정할거니까요 ^ ^
정말 저렴한 DMSO로 실험하고 있지만 결과 동일하게 잘 나옵니다.
물고기  |  2014.07.05    
근데 MTT방법을 사용하실거면 MTT보다는 resazurin을 사용해보세요. 님의 생활이 몇 배는 더 편리해질겁니다. ㅎㅎ
MTT처럼 과정이 복잡하지도 않구요. 그저 적당량의 stock용액을 배양액에 넣고 1-2시간 후에 형광을 측정하시면 됩니다. 세포의 수나 종류에 따라서 인큐베이션하는 시간은 조정해야 하지만 한두번 해보면 쉽게 알수있어요. 뭐 resazurin 이용한 키트도 팔고 그러지만 그냥 가루사서 5-10mg/ml로 PBS에 녹여서 stock만든 후 1/100-1/20정도의 양을 세포배양액에 넣어주시면 됩니다. 기작원리는 MTT와 같구요.
그럼, 좋은 결과 나오시길 바랍니다.
뒷다리해돋이02  |  05.24 20:22  
저희는 AMRESCO사용하고 있습니다
저렴하고 좋습니다
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