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1차 항체가 마우스 유래이기 때문에 blocking을 mouse serum으로 하게 되면 2차 항체가 1차 뿐만 아니라 mouse serum도 잡게되어 오히려 background signal이 매우 증가하지 않을까요
핵산님의 말이 맞습니다. mouse serum을 쓰게 되면 mouse serum의 또 다른 antibody들이 secondary에 의해 잡히겠죠.
normal goat serum을 쓰라고 권장하는 이유는 대개 사용하는 2nd antibody가 goat-raised anti-mouse or rabbit 이기 때문입니다. 2nd가 goat에서 만들어졌기 때문에 normal goat serum에는 host 단백질들이 대부분일테니 goat-raised 2nd antibody에 잡히는 nonspecific이 적을것이기 때문이죠.
이런 원리로 2nd antibody가 horse나 donkey-raised 라면 normal horse or donkey serum을 쓰는게 가장 좋겠죠. 하지만, 굳이 그렇게까지는 맞추지 않으셔도 됩니다.
저는 FBS나 BSA로 blocking 해서 잘 하고 있습니다.