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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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질문 cell counting과 cell 깔기...
어렵네요  |  2014.04.06 19:38
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)

cell counting할때요 
TE 넣고 incubate 3분 한 후 배지를 좀 더 dish에 넣어서 파이펫팅으로 좀 더 dish에서 cell 떨어지게 한 다음에 모아서 centrifuge하고 석션 해서 배지 다시 섞은 후에 cell counting을 하는데요
워낙 cell이 잘 자라서 centrifuge하고 나면 50ml tube에 cell이 엄청 많이 있는게 딱 보여요
근데 cell counting기계로(trypan blue사용) cell 갯수를 새면 너무 적어서 안세어 진다고 나와요
배지 10ml정도 섞어서 counting을 하거든요.
cell counting기계로 보면 파랗게 염색된 cell들이 엄청 많아요 이거 다 죽은 cell 염색되는거 맞죠?
TE넣고 incubate 시간이랑 배지 섞어서 다시 모으는데 시간이 좀 걸리기는 하지만 그렇다고 10분을 넘어가지는 않는데 그 사이에 cell이 다 죽는걸까요?
근데 또 이렇게 된 cell 다시 dish에 깔아서 키워보면 또 잘커요...
저번에도 이런일이 있어서 hemacytometer로 해봤는데 역시 live cell이 몇 개 안되는 것 같더라구요...
도대체 뭐가 문제일까요?ㅠㅠ
#cell counting
 
#cell culture
 
#hemacytometer
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대왕개구리안재진  |  2014.04.07   
트리판블루를 너무 고농도로 사용하고 계신것은 아닌가요?
지금 상황은 염색이 되는게 많다라는 것 인것 같습니다.
어렵네요  |  2014.04.07    
트리판 블루로 염색된게 죽은 cell 아닌가요?ㅠㅠ
염색된게 너무 많아서 저는 cell이 다 죽어서 안세어지는 줄 알았거든요...
답변 감사합니다~
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