실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
PCR 프라이머 질문 드립니다.
레벨2 아예
Forward 프라이머와 Reverse 프라이머를 섞어서 보관 할 경우에 이것들이 자칫 반응하여 밴드를 보일 수 있나요?
현재 multiplex PCR 조건을 잡는 중인데 대략40개 프라이머가 있습니다. 싱글로 랜덤 3개 프라이머를 테스트 할때는 gDNA Template를 넣지 않은(N.C)것에선 밴드가 나오지 않고 넣은 것에선 120bp 정도의 원하는 위치에서 밴드가 관찰 되었습니다. 이후 40개 중에서 20개 mix 한 것과 추가 20개 주문한 것 mix 그리고 토탈 40개 mix 한 것을 PCR 하였는데 N.C 와 실험그룹에서 모두 원하는 120bp와 그 밑에 100bp 정도의 2밴드가 나왔습니다. 우연인지 섞어놓은지 오래된 mix가 좀 더 진해 보이네요. 그날 mix하여 실험한 프라이머도 NC 그룹에서 나오긴 했습니다만...
매번 실험 때마다 40개 프라이머를 그때그때 섞어 쓸 수도 없고,,, 포워드 따로 리버스 따로 그렇게 믹스하면 좀 나을런지,,,
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