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 전체 > Molecular Biology-DNA > Sequencing
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질문 gene을 PCR후 sequencing후 확인 방법이 궁금합니다.
석사  |  2013.12.26 15:17
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
gene의 양 끝부분으로 primer를 제작 후 PCR하였습니다.
제가 알기로는 sequencing하여 읽을 경우 약 100bp정도의 data가 소실되는 것으로 알고있습니다. 그래서 F primer와 R primer로 각각 읽은 데이터를 받았는데 이 두 데이터를 합쳐서 완전한 gene의 sequence를 알고 싶습니다. 이렇게 PCR후 sequencing한 gene들이 많아 눈으로 일일이 확인하기가 까다롭습니다. 간단히 이것을 수행할 수는 없을까요?
#sequencing
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리강시  |  2013.12.26   
씨컨싱 피크와 씨컨스를 일일이 확인하세요.
그래야 mutation을 잡아낼 수 있습니다.
피크와 씨컨스를 확인한 다음에 알려진 씨컨스와 님이 확인한 씨컨스를 CLUSTAL W같은 프로그램으로 비교해서 mutation을 확인합니다.

PCR primer로 읽으면 100nt 정도는 읽지 못하는게 맞습니다.
정 말단 씨컨스가 궁금하시면 T-vector 등에 클로닝해서 읽으셔야합니다.
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