실험 Q&A Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
lysis buffer조성과 BCA assay관련 문의드립니다.
불싸한 타이레놀 (비회원)
보통 올려진 글에서 보면 Cell lysis buffer 조성은 50mM Tris-HCl (pH8.0),150mM NaCl, 5mM EDTA, 1% NP-40 또는 20mM Tris-HCl (pH7.4),250mM NaCl, 1% Triton X-100가 많은거 같습니다. 25mM Tris-HCl(pH7.4),0.5% Triton X-100 를 사용합니다. lysis buffer 조성이 너무 단순해서 혹 lysis가 잘 안되는건 아닌가요? (6well well당 100ul처리) lysis buffer에 protease inhibitor cocktail나 PMSF를 넣어줘야 하는건 아닌지 그렇다면 BCA정량시 수치에 영향을 주지는 않나요? BCA정량해서 protein양이 보통 어느정도 나와야 되는건가요? 4ug/10ul도 나오고 13ug/10ul도 나옵니다.variation이 좀 심합니다.
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