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 전체 > Molecular Biology-Protein > Pull-down Assays
조회 15968  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 Polystyrene magnetic bead 를 이용한 precipitation 시에..
Hunterx  |  2013.08.30 08:59
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
안녕하세요.
지금 polystyrene paramagnetic bead (Spherotech) 를 이용한 protein-protein interaction 실험을 IP로 진행중에 있는데요.
제가 아직 실험 초보인 학생이라서 궁금한 것이 생겼는데요.
실제 bead 에는 아무것도 labeling 이 되어있지 않는데,
교수님은 protein(A) 와 A에 결합하는 bacteriophage 를 결합시킨 후 해당 bead를 이용하여 precipitation 을 하라고 하시네요.
그런데 protein A 나 bacteriophage 나 둘 다 biotin 같은 tag 이 labeling 되어 있지 않아요;
bead도 그냥 non-labeled bead 이고요.
그래서 혹시 자성 때문에 생긴 공간에 bacteriophage 같은 macromolecule이 capture 되는 건지,
아니면 polystyrene magnetic bead 의 어떤 특별한 특성?이 있는건지 궁금하네요.
이도저도 아니라면, 제가 뭔가 실험과정을 잘못 이해했을수도 있겠네요;

#polystyrene
 
#bacteriophage
 
#precipitation
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리엘피스  |  2013.08.30   

아무런 처리가 않된 native bead를 바로 이용할 수는 없습니다.
Bead에 어떤 물질을 붙이려면 공유결합을 할 수 있는 반응기가 있거나 아니면 specific binding이 가능한 어떤 물질이 붙어 있어야 합니다.

하지만 Polystyrene은 protein이 흡착에 의해 붙을 수 있는 물질입니다. 만약 protein (A)를 흡착으로 먼저 bead에 붙여주고 실험을 진행하면 가능한 실험입니다.

Polystrene bead나 표면에 흡착으로 protein을 붙이는 방법에 대한 자료를 찾아보세요.

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