실험 Q&A Microbiology > Bacteria
SEM 시료 전처리 질문합니다ㅜㅜ
레벨1 대학원생
SEM에 대해서 이것저것 찾아보고 있으나 의문점이 해결되지 않아 질문 올립니다.
항균물질을 처리한 bacteria의 구조 변화에 대해 보려고 하는데,
우선 시약들은 준비가 되었습니다.
primary fixation 은 glutaraldehyde로 , secondary fixation은 osmium tetroxide로 하려고 합니다.
SEM을 찍기 전에 coverslip을 함께 넣고 균을 키워 부착시킨후, 고정, 탈수 시키려고 하는데
여기서 문제점이 항균물질을 넣은 대조군에서는 bacteria가 잘 자라지 않을 것 같습니다.
자라지 않는다면 coverslip에 부착하는 확률 역시 떨어질 것 같은데
제가 가진 sample 시료 수가 적어서 무턱대고 실험적으로 해 볼 수 없는 상황입니다.
질문을 정리해보자면 항균물질에 대한 bacteria의 변화를 알아보고자 할때
MIC, MBC 했던 동일 조건으로 Coverslip을 넣어 부착 시킨 후
고정, 탈수 시켜 SEM 을 찍는게 좋을까요
아니면 우선 coverslip에 균을 부착시켜 키운 후 coverslio위에 일정시간 항균물질 처리를 한 뒤
고정, 탈수 시켜 찍는 것이 좋을까요?
첫번째 방법으로 하면 bacteria가 붙지 않을 것이 염려되고,
두번째 방법을 하자니 MIC, MBC 조건들과 달라질 것이 염려됩니다.
어떤방법이 최선책일까요 ??
SEM 으로 bacteria 찍어본적 있는 선생님들 도와주세요 ㅜㅜ
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