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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
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질문 MMP2 RT-PCR
실험  | 2004.09.04 00:00
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
MMP2 RT-PCR을 했는데 어떤 sample은 2 band이고 어떤 sample은 1band(2 band 중 아랫 band)로 잡힙니다.
제가 본 논문들에는 1 band만 나온 것이 대부분인데 선배님이 제 gel 사진을 보시더니 2band로 나온 걸보니 RNA두 잘 뽑혔구 PCR이 잘 된 것 같다고 하셔서요.
이후에도 논문을 찾아봤지만 1band로 나오는 것 밖에 전 찾지 못하겠어요.
MMP 중 MMP2는 2band로 잡혀야하는 건가요? 그럼 두 밴드 각각이 무엇인지 알 수 있을까 해서요.
고수님들 도와주세요~
#RT-PCR
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
남쪽바람  |  2004.09.04    
제가 human MMP-2 RT-PCR 한거는 1band로 나옵니다.
primer짤때는 분명 원하는 사이즈에 맞게 1개의 band만 나오게 짭니다.

밴드가 2개가 잡혔다면 엉뚱한 gene을 잡았을 확률이 높습니다.
아래에 앨피스님께서 말씀하신 subtype은 MMP-2는 없습니다.

2밴드는 분명 잘못나온 겁니다.
PCR 하다보면 primer의 specificity가 떨어져서 여러 밴드가 나오는 경우가 있습니다.
그럴때는 저는 다시 primer를 새로 만들죠.

선배님께 한번 여쭈어 보세요.
왜 2밴드가 정상인지를...

물론 protein western을 하신다면 2밴드가 나옵니다. (pro-form, active-form)
하지만 RNA level에서는 primer를 제대로 짜고 PCR의 조건을 명확히 하셨다면 2밴드는 나올 수가 없습니다. MMP-2 대가들의 논문을 봐도 1 밴드만 나오는게 당연합니다.

그럼 실험 잘 되시길...
엘피스  |  2004.09.04    
Subtype이 있나요? 선배님에게 직접 물어보시죠?
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