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저는 Southern blotting에 ECL을 사용해서 재비를 마니 본 사람입니다.
probe로 사용할 DNA를 heating하고 chilling해서 single strand로 denaturation시킨 후 peroxidase랑 glutaraldehyde를 넣어주면 glutaraldehyde가 DNA의 염기와 peroxidase를 link시켜서 labelling합니다.
이걸로 labeliing이 끝납니다.
Southrn blotting 후, washing 하고나서 luminol과 H2O2를 넣어주면 peroxidase가 H2O2를 분해해서 OH- redical을 만들고 이 radical이 luminol을 자극해서 blue light를 냅니다.
기 light를 film이 감광하는 system입니다.
Amresham 홈페이지 등에서 ECL에 관한 manual 을 download해서 함 보시지요.
동위원소에 비해 signal도 강하고 film expose 시간도 5분 정도로 매우 민감합니다.
아 답변 정말 감사 드립니다. 유용하게 주신 정보 더 공부하고 사용하도록 하겠습니다. 좋은 하루 되세요