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레벨5
ExDown's
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13.06.07 08:17
저 같으면 우선 20ug로 loading 해 보겠습니다. his의 경우에 낮은 농도에서
잘 안잡히는 경우가 있습니다. 물론 antibody 차이마다 크겠지만요..
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레벨5
doubleu
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13.06.07 11:35
윗분과 같은 생각입니다. 사실 Ab마다 다릅니다만 His tag 이 유난히 안잡히는 경향이 있습니다.
E-coli에서 pure하게 뽑은 protein조차도 WB해서 signal이 강하지 않은 경우가 있더군요.
protein양을 증가시키고 Ab titer를 늘려보세요..^^
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레벨5
carpe diem
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13.06.08 21:54
농축해서 단백질의 양을 늘려보고 Ab의 titer를 늘려보는 것이 가장 쉽게 해볼 수 있는 방법입니다.
특정구조를 갖는 단백질이라면 MTT, B-ME양을 좀 더 늘려서 페이지를 내린 후 웨스턴해보시
면 도움이 될 수도 있습니다.