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레벨5
WideSky
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07.04.07 10:44
3T3-L1을 분화시킨 다음에 split을 하게 되면,
<TE를 먹이면 떨어지고 다시 붙일수는 있습니다>
<하지만 잘 안 붙고>
<잘 떨어집니다>
이런 이유로 특이한 경우(electroporation이라던지)를 제외하고는
split을 해서 사용하지는 않습니다.
그래서 well마다 일정하게 분화시켜야 하는 것이 중요하며,
이를 위해서
i) 분화시키기 전 split시에 well마다 cell number 차이 최소화
ii) split후에 잘 흔들어(섞어) 줘서 well안에서도 cell의 분포가 고르게
iii) media chase시에 cell이 떨어지지 않게 최대한 조심해서
iv) 실험전에 분화상태를 확인하고, 분화 상태에 차이가 날 경우 실험군에서 제외
시킵니다.
어쩔수는 없습니다. ;;
그리고 저희 랩은 oil-red o sigma제품을 사용합니다. sigma에도 한번 문의하심이..
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Silence
(비회원)
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07.04.07 11:13
분화시킨 후에 실험한다는 것은 lipolysis를 보기위한 실험인가요?
분화유도된 즉, aidpocyte를 다시 seeding해서 하는 방법은 해보지 않았습니다만,
제 생각에는 분화유도를 시킨후에 실험을 하시는게 좋을듯 싶네요..
그리고 well이 일정하게 분화되지 않는다는 말이 무슨 뜻인지...
만약, sample을 처리하지 않는 군에서 충분히 분화되지 않고 또한 sapmple을 처리한 군에서도 분화되지 않았다면 sample의 효과라고 보기 힘들죠..
자세한 설명이 있으면 답변해 드리겠습니다..
Oil red O는 sigma를 추천합니다..
빨리 오거든요..^^