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질문 XTT assay에 관해 문의드립니다
석사1학기 초보  | 2013.05.10 22:43
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)

Lung cancer cell line에 drug를 treat하고, proliferation을 측정하고자하는 석사초보생입니다.
다름이 아닌, 기본적으로 XTT assay의 실험에 관련해 여쭈어보고싶네요.
실험방법은 cell을 culture한 media을 blank로 잡고, control은 no drug(MOCK)으로 잡고,  drug을 treat한 cell을 sample로 계획하고 있습니다.
여기서 의문사항이 2가지가 있습니다.
제가 24시간때 XTT reagent를 처리하고자한다면 blank, 즉 cell culture시 사용한 media도 24시간동안 cell이 없는 plate well에 incubation해야하나요? 아니면 빈 배지는 incubation할 필요없이 바로 흡광도 측정해두 되나요?

2번째 질문입니다. 이부분이 가장 궁금한 부분으로, cell을 drug를 treat하고, 일정시간, 예를 들어 24시간에 XTT를 보고자할때 drug가 처리된 cell을 24h culture 후, 항상 media를 suction하고 serum free media로 교체한 뒤, XTT agent를 treat하고 3시간 incubation하였습니다. 이렇게 해도 상관없는지 문의드립니다,
부탁드립니다.

#XTT
 
#XTT assay
 
#XTT assay 방법
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리갈갈철이  |  2013.05.13   
back ground로 쓸려면 조건이 항상 같아야 하지 않을까요?
첫번째 질문은 같이 incubation. 해야 할것 같구요

두번째 질문, 왜 serum free media로 갈아주는 겉가요??
알esl123  |  06.05 20:49  

두번쨰에서 배지를 serum free로 바꾸는 이유는 XTT 염색되는 동안 세포가 성장하는것을 막기위해서라고 알고있습니다.

도움이 되셨으면 좋겟네요.

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