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 전체 > Molecular Biology-DNA > Purification/Isolation
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질문 A260/A280 DNA 순도가 높을때
DNA정제  | 2013.04.24 18:33
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
방선균의 chromosomal DNA를 purification 했습니다.
1/500으로 희석하여 OD측정결과
A260 = 0.109
A280 = 0.028
A260/A280 = 3.893 이 나왔습니다.
순도가 너무 높게 나오면 RNA가 많아서 그렇다는데
실험에 사용할 수 없을까요? RNase를 처리해서 이용할 수 있을까요?
#DNA
 
#purification
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
재측정  |  2013.04.25    
희석배율을 낮춰서 다시해보세요
알whoa  |  2013.04.26   
비율이 너무 높네요. 
RNA외의 contamination이 많거나 측정을 잘못한 경우로 보입니다. 

1/200정도로 희석해서 A260/A280 과 A260/A230을 다시 측정해 보시고 
반복 측정으로 측정실수가 있는지 체크해 봐야 할 것 같습니다. 

또한 어떤 정제방법을 사용하셨는지 모르겠지만, 프로토콜을 점검해보시고요. 

RNA외의 contamination이 있어보이고 정확한 농도정량자체가 어려우니 
RNase 처리하기 보다 새로 정제하시는 편을 권해드립니다. 
개구리carpe diem  |  2013.04.27   

희석해서 다시 측정해 보시고
샘플에 RNase를 처리하시기보다는
여건이 된다면 샘플을 새로 준비하시는 편이 나을 것 같아요

개구리오크남  |  2013.04.29   

정말 높아도 너무 높네요,
보통 다른 contaminant들에 의해, nucleic acid 가 깨졌을 경우에 A260/A280이 높아진다고 합니다.

개구리캐틀  |  2013.05.07   

저는 방선균만 아니라 다른 시료에서 DNA 추출 후 1/200~300 정로 희석해서 측정을 하였습니다.
희석배수가 조금 높은것 같으며, 다시 희석하여 측정하였을때에도 높게 나온다면 RNase 처리가 필요 하거나 re-purification이 필요 할 수 도 있을 것 입니다.
어떤 방법으로 purification을 했는지 몰라 정확한 답변이 힘들겠네요...ㅎㅎㅎㅎㅎㅎㅎ

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