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HepG2는 siRNA의 효과만 좋다면 90% 이상 knockdown하는 것도 어렵지 않습니다.
siRNA 효과는 제대로 check를 하신 것인가요?
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hepG2
(비회원)
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07.04.01 22:38
지금 사용하고 있는 siRNA의 경우에,
HT1080 에서 실험한 적이 있는데요,
HT1080의 경우 200nM 48시간동안 transfection 시켰을 경우,
siRNA에 의한 target gene knock-down 효과는 거의 80% 이상되었습니다.
이번에는 hepG2 세포에서 실험을 하게된 관계로
같은 조건에서 해보았을 때 영..;;
현재 500nM 이상의 siRNA 농도를 처리하고 72시간까지 보고 있는 상태인데요.
hepG2가 transfection 효율이 좋지 않다는 말들도 많고...
knock-down 효과도 전에 사용했던 세포보다는 좋지 않네요..ㅠ;
실험실마다 세포 상태도 다를테니 어떤 조건이라고 말씀드리는 것은 의미가 없을것 같네요.
저도 lipofectam***을 썼는데 세포에 따라 oligofectamine이 더 효율이 좋을때도 있었습니다.
제 경우에 siRNA와 liposome의 처리를 세시간이 아니라 좀 긴 시간으로 해 주었습니다.
siRNA양도 20nM~40nM 정도만 썼구요.
쓰시는 siRNA 양이 다르니 조건을 맞추어 보시는 것이 좋을 듯 합니다.
브로셔에서 나오는대로만 하면 잘 안되니까요.
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hepG2
(비회원)
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07.04.02 17:31
감사합니다..^^