[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
2019 Bio Top5 인터뷰
스폰서배너광고 안내  배너1
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Omics > Proteomics
조회 6710  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 urea buffer써서 단백질 추출하는 방법에 대해서 질문드립니다~
알danielkim  |  2013.04.18 12:56

작년까지만해도 IT전공생이었는데 생명공학과로 전과해서 공부하고 있는 학생입니다
면역학 실험실에 들어가서 실험을 하고 있는데
실험을 할때마다 자꾸 막히네요 지식이 부족하다 보니까..

밀씨에 urea buffer를 써서 단백질을 추출하고
추출된 단백질을 정량해서 elisa 한다음에 항원찾는 실험을 하고 있거든요~

urea buffer를 사용하라는데 한번도 써본적이 없어서~
인터넷으로 찾아봤더니 8M urea를 많이 사용하던데
8M urea 어떻게 만드는 방법하고, 조성이 어떻게 되고,
어떤 원리로 단백질이 추출되는지 가르쳐 주시면
참고해서 열심히 실험하겠습니다^^

#urea buffer
 
#단백질 추출
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리엘피스  |  2013.04.18   

우선 urea가 어떤 물질인지를 알아야 합니다.
Urea는 물질간의 hydrogen bonding을 끊어 denature시켜주는 chaotropic agent입니다.

정확한 protocol이 어떤 것인지는 모르겠지만 urea만으로 단백질만을 추출할 수는 없습니다.
하지만 단백질의 3차구조를 없애 단백질의 solublity를 높이거나 또는 단백질을 일차구조로 풀어주는 역할을 할 듯 합니다 (실험의 정확한 목적과 방법에 대한 내용이 없어서)

1M은 Liter당 g분자량을 녹인 농도입니다. urea의 분자량을 찾아보시고 1liter에 분자량의 8배 중량을 저울로 재서 녹이면 됩니다. 먼저 중량을 재서 비이커에 넣고 물을 부으며 1 liter를 정확히 맞춘 후 저어주면서 온도를 조금 높이면 됩니다. 만약 다른 buffer를 포함해야 한다면 미리 녹여 놓고 pH를 맞춰놓은 buffer를 농도에 맞게 넣어주되 물과 buffer 그리고 urea의 합이 1liter가 되면 됩니다.

정확히 어떤 실험이며 어떤 원리이고 조심해야 되는 것은 무엇인지 선배나 교수에게 직접 물어보는 것이 최선이라 생각합니다. 전체를 알지 못하고 얻는 단막적인 지식은 오히려 독이 될 수도 있습니다.

개구리secu  |  2013.04.18   

실험실에 Protein Purification 혹은 Protein Purification Protocols 과 비슷한 제목의 책이 없다면 구입해서 한번 반드시 읽어보시길 바랍니다. 제가 볼 때는 단순히 여기에 질문할 문제가 아닌 것 같습니다.

 

답변하기
할인행사 광고 검색광고
코람바이오텍 코람바이오텍
[OriGene] IHC Reagents, shRNA, CRISPR, Proteins, Lentivirus.. (4.27까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
Eppendorf New 25mL Conical Tubes : 혁신적인 디자인과 다양하고 편리한 사용 (4.1까지)
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
βeta
2/6  좌우
103,80099,000
144,400137,000
93,00088,000
80,90077,000
577,200548,000
67,10064,000
254,000241,000
105,100100,000
154,700147,000
51,10049,000
107,900103,000
36,50035,000
97,50093,000
86,90083,000
117,300111,000
224,300213,000
77,30073,000
50,40048,000
114,100108,000
55,70053,000
69,10066,000
50,50048,000
126,700120,000
93,50089,000
최근등록   더보기 >
웨스턴 샘플 로딩 시 팁을 얻고 싶습니다.   02.27
농도 계산에 관해서 여쭈어봅니다.   02.27
글리아딘 용해 해보신 분 있으신가요   02.27
3t3-L1 subculture 후 cell shape이 이상해요   02.27
550nm 흡광도 수치가 1 이하 나와야 정상인가요?   02.27
preadipocyte differentiation   02.27
550nm 흡광도 수치가 보통 1 이하로 나와야 정상인가요?   02.27
RNA 및 단백질 추출 관련 질문입니다.   02.27
CE-OOH 실험 관련 질문드립니다.   02.27
혐기미생물 키울 때 락앤락통에 진공구리스 바르는 것 질문입니다   02.27
라이브셀인스트루먼트
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아