[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
실험 테크니션 설문결과
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-Protein > etc.
조회 6690  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 흡광도, 효소 활성, 비활성 질문 드리겠습니다.
 | 2013.04.13 15:45
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)

안녕하세요. 실례를 무릅쓰고 효소활성에 관한 문제와 흡광도 문제에 관한 문의드립니다. 답변 주시면 감사하겠습니다.

1. The conc. of a solution of trypsin that has an A280 of 1.5 in a 0.5cm cuvette is 0.11% (e of the

1% solution in 1cm cuvette at 280nm is 14.3) (F)

1) 1.5= 14.3 * 0.5 * x M 농도값이 0.2M 이 나왔는데, % 농도로 고치게 되면 0.2mole/1L * (trypsine 분자량 23.3 KDA= 23300g/mole ) 곱해 4660g/L 이 나오고, 466g/100ml 이렇게 되면 466% 란 얘기인지요?

0.11 % 값과 너무 차이가 나서 질문드립니다.

2) 만약 1%를 몰농도로 고치게 되면 1g/100ml ->10g/1000ml -> 10g/23300g/mole/1L 로 생각하면 되는지요?

2. NADH+ H+ 로의 전환을 340nm 에서 측정한 결과 30초간 0.622 의 absorbance변화를 나타내었다. 이 LDH 의 ACTIVITY 는 몇 Unit 인가?

(e= 6.22*103, 1cm =width , 1ml=volume) LDH 활성 (IU /l) =1분동안 의 흡광도 변화 * 1,000/ 6.22



1) 30초간 0.622 흡광도 변화는 1분 이면 1.244 변화를 보이게 된다고 생각하고,

1.244= 6.22* 103( NADH 340mm 파장에서의 몰흡광 계수) * 1cm * C

C를 구해보니 0.0002 M 이 나왔고, 0.0002mole -> 200 umole 로 고쳐 200unit / L 로 나왔는데 맞는지요..

2) 실험책을 보다, 전체 효소 활성 (mlU/ L) 과 효소 활성 (mlU) 이 구분 되어있던데 만약 단위가 IU/L 대신, mIU/L 그리고 전체 효소 활성(mIU) 를 구하라 하면

효소 활성 (IU/L)= 200 units/l 효소활성 ( IU/ml)= 0.2units /ml , 전체 효소 활성 (mlU)= 0.2 UNITS , 전체 효소 활성 (IU)= 200 UNITS 이렇게 생각하면 되는지요?

전체 효소 활성과 효소 활성이 구분을 어떻게 해야 하나요?

3) Unknown conc. 의 ATP 가 PH 7.0 에서 500ml 의 용액에 녹아있다. (ATP의 e= 14,300at PH 7.0 and 260nm) 이 용액 4ml 의 흡광도는 0.143 이다. ATP solution 의 molar concentration 은 얼마인가?

또 500ml 용액속는 몇 몰 수 의 ATP 가 있는가?

몰농도는 4ml 든, 500ml 든 동일하니

0.143= 14300 * 1cm (가정하면) * 몰농도

c=0.00001 M (molar concentration)

0.00001mole* 0.5L = 0.000005 mole 맞는지요?

4) 어느 정도 정제된 LDH active fraction 10 чl(마이크로 리터) 가지고 1ml 의 cuvette를 사용해 (1cm의 path length) △A 340 을 측정해본 결과 1분동안 25 。C 에서 0.622를 나타내었다. 이 active fraction 의 단백질 량이 0.5 mg/ml 이라 할때 specific acticity 는?

비활성 LDH g당 unit 활성, 10unit/mg 으로 표기한다.

0.622=6.22* 103 * 1cm * C

0.0001 M -> 100UNITS/L LDH 효소 활성은 100 Units/L 이 맞는지요? 만약 ml 라면 0.1units/ml 인지요?

또 specific activity 는 전체 효소량 ( 0.5mg/ml 의 0.01ml 취해 1ml 로 희석해 결국 100배 희석 했으니 0.005 mg/ml) 로 나눈다면

100units/L/ 0.005mg/ml 이렇게 나누어 20 이 나왔는데 20units/mg 맞는지요 ?

여기에서 전체 효소 활성( mIU), 효소 활성 (mIU/L) 은 어떻게 구하는지 궁금합니다.

답변 주시면 정말 감사하겠습니다.

그리고 전체 효소 활성 (mlU/ L) 과 효소 활성 (mlU) 구하면 어떻게 되는지 궁금합니다.


초면에 어떤분이  많이 가르쳐 주셔서 여기까진 알겠는데 제가 책만 보고 혼자 해보려니 도저히 모르겠습니다. 잘못된 부분혹은 첨가해야 할 부분을  가르쳐 주시면 정말 감사하겠습니다.

#흡광도
 
#효소
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리secu  |  2013.04.13   

1. The conc. of a solution of trypsin that has an A280 of 1.5 in a 0.5cm cuvette is 0.11% 1. The conc. of a solution of trypsin that has an A280 of 1.5 in a 0.5cm cuvette is 0.11% (e of the 1% solution in 1cm cuvette at 280nm is 14.3) (F)

 

여기서 14.3:1=1.5: x ==> x= 0.10489 입니다. 그러니까 0.10%라고 해야 하는데 아마도 계산 실수한 것 같구요..

 

그리고 0.5cm cuvette은 존재하기는 하지만 아주 특수한 용도구요. 일반적인 큐벳은 1cm 입니다. 아마 실험자가 실수로 0.5ml cuvette을 착각한 것 같네요. 여기서 e 라고 쓴 것도 사실 잘못이죠. extinction coefficient 라고 명확하게 써줘야죠 

2번 문제는 식이 맞다면 그냥 식에 값만 대입하면 되는 것 같은데.. 

LDH 활성 (IU /l) =1분동안 의 흡광도 변화 * 1,000/ 6.22

= 0.622 * 2 * 1000 /6.22 (IU/L)

= 200 IU

 

그런데 3번은 별로 문제가 아닌 것 같은데 4번은 문제가 좀 이상하네요. unit에 대한 정의가 빠진 것 같아서..

전체적으로 문제가 뭔가 성의가 없이 만들어진 느낌입니다. 특히 4ml을 취해서 흡광도를 취했다는 것은 도대체 왜 그런 표현을 넣었는지 모르겠네요

답변하기
할인행사 광고 검색광고
바이오디 바이오디
Wet 방식의 장점에 속도와 편리함까지 지닌 eBlot & eStain 파격 할인 (8.31까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
TECAN 한국대리점 20주년 기념 할인 행사 (12.31까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
nanoString & COVID-19 / 다양한 Cloning application에 적용 가능한 com... (8.27까지)
케이비티 케이비티
[KBT] Thermo Shaker, Sonicator, Mixer, Heating Block, Rotato.. (8.16까지)
브래디 브래디
초저온라벨 등 실험실용 풀칼라프린터 (COVID-19 안전사인 지원) (8.30까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN] Reading과 형광 Imaging을 하나의 장비로 한 번에!! [Multi-mode micr.. (8.31까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
qPCR/PCR 셋업을 자동분주기로 개선해보세요. : epMotion5070PCR (8.8까지)
프리미엄 등록안내
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
2/6  좌우
468,000
52,60050,000
17,000
773,000734,400
370,000
139,000132,100
493,000
739,000702,100
47,20044,900
23,000
66,50063,200
79,50075,600
136,000129,200
482,000
130,500124,000
6,000
49,000
482,000
92,30087,700
109,000
339,400322,500
93,20088,600
125,500119,300
143,800136,700
최근등록   더보기 >
IP 실험   08.04
DNA extraction할 때 salt차이   08.04
Melan-A RPMI 1640 medium 질문이요!   08.04
탄수화물 소화실험에서 무엇을 측정하면 될까요?   08.04
western blot으로 특정 인자 band만 계속 안나옵니다 (bcl-2 보신 분 도움...   08.04
WB sample 농도   08.04
마우스 임신 test기   08.04
primer, probe 만들 gene 선택   08.04
genomic DNA extraction 과정 중에   08.04
11,000 bp와 12,000 bp의 vector를 전기영동으로 구분할수 있을까요 ?   08.03
(주)비아이코퍼레이션
실험관련연재
박은총 연재중후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
Mr.S 연재중의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재중실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크