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전체 > Molecular Biology-RNA > Purification/Isolation |
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조직으로 real-time PCR하시는분들께 |
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답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의) |
여기에 질문은 처음 남깁니다..
제가 지금 너무 큰 문제에 봉착해서요..ㅠㅠ
제가 지금 하는 조직은 human breast tissue입니다.
Trizol로 RNA를 뽑는데 lipid가 많이 뜨고요..
cDNA를 얻어서 real-time PCR을 하는데 기계가
actin이나 GAPDH를 detecting하지 못합니다.
외국 논문을 찾아보니 저랑 똑같은 actin primer(catalog number동일)
로 한 결과가 정상적으로 나왔더라구요
그냥 taq polymerase로 PCR해보니 정상적으로 band가 나옵니다.
따라서 cDNA가 없는 상태는 아니라고 보는데요
RNA purity도 괜찮았구요
cell-line(HEK 293T)으로도 동일하게 해 보았는데 아주 잘 나왔습니다.
저와 비슷한 경험이 있어서 trouble shooting에 성공하신
분들이 계신지요.. 조언 부탁드립니다. |
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본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다. |
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Kartrider | 2007.03.29
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actin이나 GAPDH가 mouse에서만 잡히는 primer가 아니신지요..? |
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