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 전체 > Molecular Biology-RNA > Purification/Isolation
조회 3653  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 조직으로 real-time PCR하시는분들께
dNTP  | 2007.03.28 20:02
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
여기에 질문은 처음 남깁니다..
제가 지금 너무 큰 문제에 봉착해서요..ㅠㅠ

제가 지금 하는 조직은 human breast tissue입니다.
Trizol로 RNA를 뽑는데 lipid가 많이 뜨고요..
cDNA를 얻어서 real-time PCR을 하는데 기계가
actin이나 GAPDH를 detecting하지 못합니다.
외국 논문을 찾아보니 저랑 똑같은 actin primer(catalog number동일)
로 한 결과가 정상적으로 나왔더라구요

그냥 taq polymerase로 PCR해보니 정상적으로 band가 나옵니다.
따라서 cDNA가 없는 상태는 아니라고 보는데요
RNA purity도 괜찮았구요

cell-line(HEK 293T)으로도 동일하게 해 보았는데 아주 잘 나왔습니다.

저와 비슷한 경험이 있어서 trouble shooting에 성공하신
분들이 계신지요.. 조언 부탁드립니다.
#조직 real-time PCR
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리Kartrider  |  2007.03.29   
actin이나 GAPDH가 mouse에서만 잡히는 primer가 아니신지요..?
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