안녕하세요. 제가 처음으로 in situ hybridization을 하고 있습니다. 처음 해보는 것이고 주위에 도움받을 곳이 없네요. 기본적인 질문부터가 rna probe 제작하고 있는데요, 안티센스나 센스나 상관이 없는건가요? 하이브리제이션 할때는 둘다 따로 따로 반응시켜야 하는건가해서요. 그리고 클로닝후에 in vitro transcription 시에 제한효소로 잘라서 linearlzed dna 를 사용해야 하는데 프로모토가 각각 양방향에 들어가 있는 형태로 단편화 시킨후에 (pblue에 클로닝후 pvu2로 자르면 t7, t3 promoter각 양방향으로 들어가 있습니다. ) 사용하면 안되는건가요? 아님 t3, t7 중 어떤걸 사용해야 할까요? 답변 부탁드릴께요.